Latar Belakang: Bakteri Coliform adalah bakteri yang memiliki habitat normal di usus manusia dan juga hewan berdarah panas. Coliform merupakan indikator adanya polusi kotoran dan kondisi yang tidak baik terhadap makanan atau minuman. E.coli merupakan flora normal dalam alat pencernaan manusia dan hewan. Es jeruk memiliki potensi terkontaminasi mikroorganisme. Hal ini bisa terjadi jika kebersihan pengolahan makanan tidak higenis. Tujuan Penelitian: ini adalah untuk mengetahui adanya cemaran bakteri Coliform dan Escherichia coli pada es jeruk yang dijual pedagang keliling di distrik Jayapura Utara. Jenis Penelitian: ini adalah deskriptif dengan menggunakan desain observasi laboratorium. Sampel diuji dengan menggunakan metode Most Probable Number (MPN). Hasil Penelitian: bahwa deteksi bakteri Coliform dan E.coli pada minuman es jeruk didapatkan hasil dari 6 sampel yang diuji mengandung bakteri Coliform dan E.coli yang telah melewati ambang batas cemaran mikroba yang telah ditetapkan oleh SNI 7388:2009 dalam Badan Standarisasi Nasional Indonesia yaitu Coliform 20/ml dan E.coli <3/ml. Kesimpulan: bahwa seluruh sampel (100%) mengandung cemaran Coliform dan dari 6 sampel didapatkan sampel (50%) mengandung cemaran Escherichia coli.

Kata Kunci : Bakteri Coliform, Escherichia coli, Es Jeruk